EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。...
如何儲存和解凍胎牛血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。按如下操作可避免沉...
PicoGreen熒光染料法是一種靈敏的雙鏈DNA檢測方式,通過Modulus檢測儀可以檢測到pg級的微量DNA。這種方法主要用來測定微量的DNA殘留,或?qū)NA樣品進(jìn)行定量。作為DNA染色劑之一的PicoGreen熒光染料特異性地與樣品中雙鏈DNA結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號。PicoGreen技術(shù)可以檢測到低達(dá)0.5納克雙鏈DNA的變化。DNA的微量增加引起熒光信號強(qiáng)度或相對熒光單位(RFU)的顯著增加。其自發(fā)熒光忽略不計(jì),重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差異低,不受樣品化學(xué)成分的干擾。Picogree...
市場上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,很多科研工作者,特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人,難以分辨胎牛血清質(zhì)量的優(yōu)劣。選購胎牛血清請注意以下幾點(diǎn):一、外觀拿到胎牛血清,先接觸的是血清外觀,對于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來說,外觀的判斷尤為重要1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散,...
外泌體的提取主要包括以下幾種方式,一是超速離心法,這是目前外泌體提取常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時,量少。四是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡單、不...
使用方法1)取出印記膜,加入合適的封閉液在溫室下孵育20-60分鐘,同時振蕩,以封閉膜上非特異性蛋白結(jié)合位點(diǎn)。2)將膜從封閉液中取出,與一抗工作液在溫室孵育1小時,同時振蕩;或在28℃孵育過夜,不振蕩。3)將足量的洗滌緩沖液加至膜上,保證緩沖液將膜*覆蓋。振蕩孵育≥5分鐘,更換洗滌緩沖液并重復(fù)該步驟4-6次。增加洗滌緩沖液體積,洗滌次數(shù)和洗滌時間有助于降低背景信號。注:1)孵育前,膜在洗滌緩沖液中的短暫淋洗會提高洗滌效率;2)按前文建議的HRP標(biāo)記二抗稀釋度非常重要的。4)將...
線粒體染色試劑盒使用一種專屬染料,選擇性地在不同膜電位的線粒體中積累。這種線粒體指示劑是一種疏水性復(fù)合物,可以輕易地滲透進(jìn)入活細(xì)胞中,且當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性線粒體指示劑可以在線粒體中保留很長時間,因?yàn)樵撝甘緞в心芏ㄎ挥诩?xì)胞的基團(tuán)。其關(guān)鍵特征是其染色效率顯著性提高,本標(biāo)記方法十分穩(wěn)定,需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中,例如微孔板分析,免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)。它也可以用于多種不同類型的研究中,包括細(xì)胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細(xì)胞活性、細(xì)胞...
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