線粒體染色試劑盒的作用說明
更新時間:2018-04-20 點擊次數(shù):1310
線粒體染色試劑盒是設計用來標記活細胞的線粒體的,使之帶綠色熒光。本試劑盒使用一種專屬染料,選擇性地在不同膜電位的線粒體中積累。這種線粒體指示劑是一種疏水性復合物,可以輕易地滲透進入活細胞中,且當進入細胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性線粒體指示劑可以在線粒體中保留很長時間,因為該指示劑帶有能定位于細胞的基團。其關鍵特征是其染色效率顯著性提高。本標記方法十分穩(wěn)定,需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中,例如微孔板分析,免疫組化和流式細胞術。它也可以用于多種不同類型的研究中,包括細胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細胞活性、細胞凋亡和細胞毒性的研究。本試劑盒提供所有的必需組分和*細胞標記方法。它適用于增殖型和非增殖型細胞,也可以用于懸浮和貼壁細胞。
線粒體染色試劑盒是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針,JC-1染料表現(xiàn)出電勢依賴性的積聚在線粒體內。正常線粒體內,JC-1聚集在線粒體基質中形成聚合物,聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光Ex=585 nm, Em=590 nm不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。因此顏色的變化非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。線粒體的去極化程度也可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。
線粒體染色試劑盒的破壞是細胞凋亡早期發(fā)生的一個標志性事件。細胞受到凋亡誘導后線粒體膜電位的變化使得膜的通透性發(fā)生改變。膜通透性的增加,使得線粒體蛋白包括細胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內切酶G(EndoG)、凋亡誘導因子(AIF)等從線粒體基質釋放到細胞漿。細胞色素C的釋放伴隨膜電位的*喪失,進而引發(fā)細胞凋亡酶的級聯(lián)效應.本試劑盒提供了CCCP 作為誘導線粒體膜電位下降的陽性對照.對于六孔板中的樣品,本試劑盒共可以檢測100 個樣品;對于12 孔中的樣品,本試劑盒共可以檢測200 個樣品.這種特殊的試劑盒被設計為大的斯托克斯位移在Ex/Em = 405/550 nm處標記活細胞線粒體,使之帶橙色熒光;試劑盒使用專有的染料,選擇性地積聚在不同膜電位的線粒體中.是一種疏水性復合物,可以容易地滲透到完整的活細胞中,在進入細胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性線粒體指示劑可以在線粒體中保留很長時間,因為該指示劑帶有能定位于細胞的基團。這個關鍵的功能,顯著的提高了其染色效率。試劑盒中使用的線粒體染色非常耐光,使得熒光相當強勁。它可以很容易地適應各種各樣的熒光平臺,如微孔板檢測、免疫細胞化學和流式細胞儀;以及各種各樣有用的的研究,包括細胞粘附、趨化性、多藥耐藥、細胞活力、細胞凋亡和細胞毒性。